วิธีการใช้ :
1 การแยกตัวอย่าง DNA
ขอแนะนำให้ใช้การสกัดกรดแบบนิวเคลียส ชุดฉือเจียจวง Shengbo
บริษัทเทคโนโลยีชีวภาพจำกัดเพื่อการสกัดตัวอย่าง DNA โปรดใช้งานตามน้ำยา
คำแนะนำ
2 การเพิ่มตัวอย่าง
หลังจากการละลายน้ำแข็งตามธรรมชาติของสารละลายปฏิกริยา 17μ PCR ให้นำ 3 l ไปใส่ในหลอด PCR แล้วบวกไป
μ ลิตรของกรดนิวเคลียริกที่สกัดในขั้นตอนที่ 1 คลุมฝาท่อทั้งแบบผสมและเครื่องหมุนเหวี่ยง
3 การขยายเสียง PCR
3.1 วางหลอดปฏิกิริยาในถังปฏิกริยา PCR จากการสะท้อนจากฟลูออเรสเซนต์เชิงปริมาณ
3.2 ตั้งชื่อตัวอย่างและข้อมูลช่อง
4 การวิเคราะห์ผลลัพธ์
4.1 การตั้งค่าเงื่อนไขการวิเคราะห์ผลลัพธ์
กำหนดเส้นพื้นฐานและค่าเกณฑ์ขั้นต่ำ : โดยทั่วไปจะวิเคราะห์ผลลัพธ์โดยตรงตามเครื่องจักร
4.2 การวิเคราะห์ผลลัพธ์
ดูผลลัพธ์ ของประเภทย่อย H5 ในช่อง fam ประเภทย่อย H5 ในช่อง HEX ( หรือ
VIC นายโจ ) และประเภทย่อย H9 ในช่อง Cy5
บวก : ค่า CT ของช่องตรวจจับ≤ 37.0 และเส้นโค้งมีการเติบโตเป็นทวีคูณอย่างเห็นได้ชัด
เส้นโค้ง ;
น่าสงสัย : หากค่า CT ของช่องตรวจจับอยู่ในช่วง 37.0 และ 40 ( ค่า CT< 37.0≤40 )
,
ขอแนะนำให้ทำการตรวจจับซ้ำ ถ้าผลลัพธ์การทดสอบเหมือนกัน และเส้นโค้งมี
เส้นโค้งการเติบโตที่ชัดเจนซึ่งกำหนดให้เป็นค่าบวกมิฉะนั้นจะเป็นค่าลบ
ค่าลบ : ไม่มีค่า CT
5 ข้อจำกัดของวิธีการตรวจจับ
ขั้นตอนที่
จำนวนรอบ
อุณหภูมิ
เวลา
กำลังเก็บสัญญาณ
1
1 รอบ
90 º C
30 วินาที
ไม่
2
1 รอบ
60 º C
5 นาที
ไม่
3
95 º C
1 นาที
ไม่
4
40 รอบ
95 º C
10 วินาที
ไม่
5
60 º C
31 วินาที
ผลการทดสอบ YesSample เกี่ยวข้องกับการเก็บตัวอย่างการประมวลผลการขนส่งและการจัดเก็บ
คุณภาพ ;
หากการปนเปื้อนระหว่างอาหารไม่ได้รับการควบคุมอย่างดีในระหว่างการแยกตัวอย่างผลลัพธ์ที่เป็นบวกที่ผิดพลาด
จะปรากฏขึ้น
การรั่วไหลของผลิตภัณฑ์ที่มีการควบคุมและการขยายเสียงที่เป็นบวกจะทำให้เกิดผลลัพธ์ที่ผิดพลาด
วิธีการแยกที่แตกต่างกันจะมีประสิทธิภาพในการแยกที่แตกต่างกันซึ่งจะทำให้เกิดความผิดพลาดได้
ผลลัพธ์ที่เป็นลบ ;
การเคลื่อนย้ายน้ำยาการจัดเก็บที่ไม่เหมาะสมหรือการเตรียมน้ำยาที่ไม่ถูกต้องจะทำให้ลดลง
ประสิทธิภาพการตรวจจับน้ำยาทำให้เกิดการตรวจจับเชิงปริมาณที่ผิดพลาดหรือไม่แม่นยำ
ผลลัพธ์ ;
ผลการทดสอบใช้สำหรับการอ้างอิงเท่านั้น หากคุณต้องการวินิจฉัยโปรดทำการรวมกับ
อาการทางคลินิกและวิธีการทดสอบอื่นๆ
6 มาตรฐานการควบคุมคุณภาพ
วัสดุควบคุมคุณภาพลบ : ไม่มีเส้นโค้งการขยายที่ชัดเจนหรือจอแสดงค่า CT
วัสดุควบคุมคุณภาพบวก : ส่วนโค้งการขยายสัญญาณมีการขยายดัชนีที่ชัดเจน
ค่า S-shape และ CT ≤ 32
ควรปฏิบัติตามเงื่อนไขข้างต้นในเวลาเดียวกันมิฉะนั้นการทดลองจะเป็น
พิจารณาว่าไม่ถูกต้อง
7 ดัชนีประสิทธิภาพผลิตภัณฑ์
อัตราความบังเอิญของการอ้างอิงแบบบวกและแบบลบ : 5 การอ้างอิงแบบบวกเท่ากับร้อยละ 100
10 การอ้างอิงลบมีค่าเท่ากับ 100 %
ขีดจำกัดการตรวจจับขั้นต่ำคือ 5 × 102 สำเนา / มล .
ความเที่ยงตรง : ค่าสัมประสิทธิ์ความผันแปร (CV) ของค่า CT ของการตรวจจับความเที่ยงตรงภายในและ
ระหว่างชุดข้อมูลคือ≤ 3 %
ซัพพลายเออร์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้ว 
